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熒光共振能量轉移 (FRET) 是兩個發色團(供體分子和受體分子)之間依賴于距離的能量轉移。當靠近時,電子激發的供體生色團可以通過分子內長程偶-偶耦合相互作用以非輻射方式將能量轉移到受體生色團。因此,能量的轉移淬滅了供體的熒光強度并減少了其激發態壽命,同時增加了受體生色團的排放系數。由于 FRET 的效率取決于分子間分離的反六次方,因此它是一種有利的技術,可用于研究產生分子接近度變化的各種生物現象
1.百螢 RPE-Cy5-鏈霉親和素偶聯物概述?? 鏈霉親和素偶聯物常與生物素綴合物一起用于特異性檢測各種生物分子,因為鏈霉親和素對生物素及其綴合物具有非常高的親和力。 RPE-Cy5-鏈霉親和素偶聯物包含鏈霉親和素(作為生物素結合蛋白)與共價連接的 RPE-Cy5(作為熒光標記)。當與生物素化一抗結合使用時,它可用作間接熒光染色的二步試劑。它是使用流式細胞術和 Cy5? 濾波
鈣測量對于許多生物學研究至關重要,鈣離子熒光探針腔腸素是進行鈣測量的有效工具,跟著小螢一起看看它是怎么工作的吧。?1.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素工作原理水母發光蛋白復合物包含22kD的載水母發光蛋白,分子氧和發光體腔腸素。當三個Ca2 +離子與該配合物結合時,腔腸素被氧化為腔腸酰胺,并伴有二氧化碳和藍光的釋放。水母發光蛋白的生物發光對Ca2 +濃度的大約三次方依賴性,可以在?0.1 μM
注1:整個綴合過程可以在?內完成。但是,綴合前對APC?的純化可能需要24-48小時。除了下面列出的材料外,您還需要濃度至少為2mg/ml的抗體溶液。請您在進行APC抗體綴合實驗之前熟悉如何使用脫鹽柱以及如何吸光度光譜。注?2?:?SMCC-APC綴合物非常穩定(在“交換緩沖液”中,在4℃下至少可以穩定幾個月)。因此,??如果您
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